产品货号:
YT477
中文名称:
N端mCherry标签融合蛋白质粒(红色荧光蛋白)
英文名称:
pCMV-N-mCherry
产品规格:
1μg|100μg
发货周期:
1~3天
产品价格:
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本制品的哺乳动物细胞表达质粒,用于表达N端含mCherry (DsRed的突变体,一种非常明亮的红色荧光蛋白)标签的融合蛋白。该质粒含有CMV启动子,可以高效启动目的蛋白在细胞中的表达。在多克隆位点的前面有一个mCherry的完整编码序列,因此在多克隆位点根据阅读框插入目的基因就可以表达N端含有mCherry标签的融合蛋白。利用mCherry的荧光特性可以比较容易地观察融合蛋白的表达水平和细胞内定位,也可以利用mCherry抗体来检测或免疫沉淀融合蛋白。mCherry与GFP没有序列同源性,不能使用GFP抗体检测mCherry。该质粒为卡那霉素抗性。转染细胞后,可以使用G418筛选稳定表达目的蛋白的细胞株。

组分 | 1μg | 100μg |
pCMV-N-mCherry | 1μg | 100μg |
说明书 | 1份 | 1份 |
保存:-20℃

Feature Nucleotide | Position |
CMV promoter | 1-602 |
T3 promoter and T3 primer binding site | 620-639 |
mCherry | 677-1384 |
Multiple cloning site | 1385-1474 |
T7 promoter and T7 primer binding site | 1494-1515 |
SV40 polyA signal | 1527-1910 |
f1 origin of ss-DNA replication | 2048-2354 |
bla promoter | 2379-2503 |
SV40 promoter | 2523-2861 |
Neomycin/kanamycin resistance ORF | 2896-3687 |
HSV-thymidine kinase (TK) polyA signal | 3688-4146 |
pUC origin | 4275-4942 |

pCMV-N-mCherry质粒(4994bp)的图谱如下:


pCMV-N-mCherry的多克隆位点的详细图谱如下:


- pCMV-N-mCherry中没有的酶切位点包括:
AclI AflII AscI AsiSI BaeI BcgI BlpI BmgBI BsiWI BsmBI BspEI BspQI BssHII BstXI BstZ17I EarI EcoNI FseI NotI NruI PmeI PmlI PpuMI PshAI PspXI SacII SapI ScaI SmaI SwaI TspMI XmaI XmnI - pCMV-N-mCherry中的单酶切位点包括:
NdeI CA`TA,TG 240 BglII A`GATC,T 1421 SnaBI TAC|GTA 346 PaeR7I C`TCGA,G 1427 CspCI ,NN`(N)11CAA(N)5GTGG(N)10,NN` 382 XhoI C`TCGA,G 1427 NheI G`CTAG,C 597 XbaI T`CTAG,A 1433 BmtI G,CTAG`C 597 SpeI A`CTAG,T 1439 SacI G,AGCT`C 651 PspOMI G`GGCC,C 1445 Eco53kI GAG|CTC 653 ApaI G,GGCC`C 1445 AfeI AGC|GCT 660 PvuI CG,AT`CG 1525 AgeI A`CCGG,T 664 BclI T`GATC,A 1681 AhdI GACNN,N`NNGTC 871 MfeI C`AATT,G 1774 SbfI CC,TGCA`GG 1032 HpaI GTT|AAC 1787 BbsI GAAGACNN`NNNN, 1112 BtsI GCAGTG,NN` 1861 PflMI CCAN,NNN`NTGG 1113 MluI A`CGCG,T 1910 BbvCI CC`TCA,GC 1215 DraIII CAC,NNN`GTG 2137 Bpu10I CC`TNA,GC 1215 SfiI GGCCN,NNN`NGGCC 2796 BsgI GTGCAG(N)14,NN` 1269 ClaI AT`CG,AT 2864 SgrAI CR`CCGG,YG 1358 BspDI AT`CG,AT 2864 XcmI CCANNNN,N`NNNNTGG 1362 EagI C`GGCC,G 2930 BsrGI T`GTAC,A 1377 Tth111I GACN`N,NGTC 3142 BamHI G`GATC,C 1385 PflFI GACN`N,NGTC 3142 HindIII A`AGCT,T 1391 BsrDI GCAATG,NN` 3257 EcoRI G`AATT,C 1403 RsrII CG`GWC,CG 3540 EcoRV GAT|ATC 1411 BstBI TT`CG,AA 3706 SalI G`TCGA,C 1415 BsaI GGTCTCN`NNNN, 4013 AccI GT`MK,AC 1416 PciI A`CATG,T 4942

pCMV-N-mCherry质粒中推荐使用的测序引物序列如下:
N-mCherry primer (1284-1303):5'-AGTTGGACATCACCTCCCAC-3'
T7 primer (1494-1515):5'-GTAATACGACTCACTATAGGGC-3'

pCMV-N-mCherry的全序列信息:pCMV-N-mCherry-seq序列

pCMV-N-mCherry质粒转染细胞后的表达效果请参考图3。

图3.pCMV-N-mCherry质粒转染细胞后的表达效果图。左侧为明场照片,右侧为荧光照片。

- 本质粒未经我司书面许可不得用于任何商业用途,也不得移交给订货人所在实验室外的任何个人或单位。
- 本制品仅限于专业人员的科学研究用,不得用于临床诊断或治疗,不得用于食品或药品,不得存放于普通住宅内。
- 为了您的安全和健康,请穿实验服并戴一次性手套操作。

- 首次使用1μg包装的本制品时,请先取少量本质粒转化大肠杆菌,进行质粒小量、中量或大量抽提后再用于后续用途。抽提获得的质粒可以通过酶切电泳进行鉴定,或通过测序进行鉴定。
- 100μg包装的本制品质粒浓度为0.1μg/μL,共1mL。可以直接用于酶切或者转染细胞。
- pCMV-N-mCherry质粒在其多克隆位点适当酶切后可以插入待表达的目的基因,构建的质粒可以用常规方法转染细胞。
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